产品目录

Taq PCR MasterMix是由Taq DNA Polymerase、Mg²⁺、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，并可最大限度地减少人为误差和污染。独特的MasterMix配方使扩增产物得率高，重复性强，稳定性好。本制品已加入染料（蓝色），反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的PCR产物3'端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。

• 经检验无外源核酸酶活性；
  
• PCR方法检测无宿主残余DNA；
  
• 能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

• PCR反应体系：
  

  成分	用量	终浓度
  2×Taq PCR MasterMix(With Dye)	25μL	1×
  Forward Primer，10μM	2μL	0.4μM
  Reverse Primer，10μM	2μL	0.4μM
  Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μL
  ddH2O	至50μL

  
  注意：引物浓度请以终浓度0.1～1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
  
• PCR反应条件：
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	94℃	2min	1
  变性	94℃	30 s	25～35
  退火	55～65℃	30 s
  延伸	72℃	30 s
  终延伸	72℃	2min	1

  
  注意：
  
  • 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
    
  • 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本制品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2kb/min。
    
  • 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。